CHAPITRE II : Matériel et Méthodes

II. 4. 2. Protocole expérimental :

้ On utilise 40 g de tubercules secs et broyés d’Aristolochia longa L.

้ On les met dans un bol en porcelaine, et on verse 240 ml d’eau physiologique. C’est notre solution mère.

้ On laisse la solution mère macérer pendant une demi heure, on filtre la solution deux fois de suite (Fig. 32).

้ On prend quatre tubes de culture stériles et étiquetés, contenant 3 ml d’eau physiologique chacun.

้ A partir de la solution mère (qui nous servira de témoin) on prépare dans les tubes cités des dilutions au 1/2,1/4 ,1/8, 1/16 (Fig. 33).

้ On prend cinq boites de pétri, on les divise en cinq au marqueur, on note sur la boite le témoin (solution mère), ainsi que les bactéries dans chaque compartiment de la boite de pétri. (Fig. 34).

้ On dépose 2 ml de la solution mère sur la boite de pétri, (Fig. 35). On coule la boite de 18 ml du milieu Muller -Hinton. (Fig. 36).

้ On agite pour homogénéiser le milieu.

้ Les mêmes étapes sont répétées pour les différentes dilutions.

้ On laisse refroidir, ensuite on met les boites dans l’étuve pour éliminer toute vapeur d’eau. (Fig. 37).

้ On prépare nos suspensions bactériennes à partir de souches de référence du laboratoire de la clinique BEN BOULAID- CHU de BLIDA, à savoir : E. coli ATTC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Pseudomonas areruginosa ATCC 27853, Enterococcus feacalis ATCC 29212, avec l’inoculum 0,5 Mac Farland. (Fig. 38).

้ On sort les boites de pétri de l’étuve.

้ On dépose dans chaque boite de pétri une goutte du Mac Farland. (Fig. 39).

้ On laisse incuber pendant 18 heures à 37°C.